巢式pcr检测油茶根腐病菌的研究

为建立油茶camellia oleifera根腐病菌层生镰刀菌fusarium proliferatum的巢式聚合酶链式反应（pcr）快速检测体系．扩增层生镰刀菌核糖体dna基因间隔序列（its）区并测定其序列，比较该序列与genbank中近似种的its序列差异．设计了特异性引物gf1和gr2，利用该对引物与its1和its4进行巢式pcr扩增检测层生镰刀菌。结果显示，巢式pcr对层生镰刀菌的检测灵敏度可达100ag基因组dna，比常规扩增方法提高了1万倍。利用设计的gf1／gr2特异性引物与its区通用引物进行巢式pcr扩增．可灵敏地扩增出油茶根腐病菌层生镰刀菌dna。完成机构：中南林业科技大学林学院,湖南长沙410004