应用液相色谱-质谱联用技术检测血浆样品中丹参酚酸类成分的浓度

目的：研究丹参酚酸中丹参素（tanshinol，tsn）、原儿茶醛（protocatechualdehyde，pca）、丹酚酸a（salvianolic acid a，saa）、丹酚酸b（salvianolic acid b，sab）及丹酚酸d（salvianolic acid d，sad）的电喷雾串联质谱（esi-ms／ms）检测特性，为开展复方丹参滴丸药代研究，建立灵敏可靠的定量分析血浆样品中丹参酚酸浓度的方法。方法：研究丹参酚酸的电离模式及效率、二级质谱的碎片离子及打碎效率；建立有效可靠的从血浆样品中提取被测丹参酚酸物质的前处理方法；优化色谱条件、减少分析干扰、促进质谱检测；围绕准确性、精密度和提取回收率等进行方法学验证。结果：电喷雾（esi）负离子模式能有效实现丹参酚酸被测化合物的电离。以下离子对m／z197→135、137→108、493→295、717→519、417→197分别为被测化合物偈n、pca、saa、sab、sad提供最佳的选择离子对监测（srm）检测条件。为取得可靠的分析结果，建立了两个分析方法：其一用于测定血浆样品中的tsn；其二用于测定血浆样品中的pca、saa、sab和sad。两个分析方法均以hci酸化血样后用乙酸乙酯提取的方法处理血浆样品，其中，tsn的提取回收率在57．7％～61．6％之间；pca、saa、sab和sad的提取回收率在38．0％～58．9％之间。偈n的线性范围为2．7～2000．0ng／ml，相关系数r为0．999，最低检测限（lloq）为2．7ng／ml；pca、saa、sab及sad的线性范围为1．4～1000．0ng／ml或4．1～1000．0ng/ml，相关系数r〉0．99，lloq分别为1．4ng／ml（pca）和4．1ng/ml（saa、sab和sad）。两个分析方法的日内准确性和精密度分别为90％～112％和2．5％～14．5％；日间准确性和精密度分别为91％～110％和0．7％～9．8％。结论：成功建立了能够灵敏可靠地测定血浆样品中5种丹参酚酸化合物浓度的分析方法，此方法可用于复方丹参滴丸的药代动力学研究。完成机构：[1]中国科学院上海药物研究所上海药物代谢研究中心,上海201203 [2]四川省凉山食品药品检验所,四川西昌615000 [3]天津中医药大学,天津300193