维甲酸和茶多酚对结肠癌细胞微卫星序列不稳定的抑制作用

目的 以复制错误（replication error,rer^+)表型的人结肠癌细胞株rko作为靶细胞，研究全反式维甲酸（all-trans-retinoic acid,atra)和茶多酚（polyphenon,pp)对肿瘤细胞微卫星序列（microsatellite sequence,ms)突变的影响，并观察肿瘤细胞内碱基错误误配对修复（mismatch repair,mmr)基因hmlh1和hmsh2的表达情况。方法 将含有外源性ms（ca）14的穿梭质粒pcmv-car转染rer^+人结肠癌细胞株rko。外源性的（ca）14的突变可使质粒标记基因lac z恢复正常读码，表达产生β－半乳糖苷酶，后者使x－gal变蓝。全反式维甲酸和茶多酚对ms的影响可直接通过x－gal染色结果判断。利用逆转录－聚合酶链反应方法，检测经全反式维甲酸和茶多酚处理的rko细胞中碱基错误配对修复基因hmlh1和hmsh2的表达情况。结果 全反式维甲酸1μmol/l、0．1μmol/l，茶多酚3μg/ml，对rko细胞的增殖无明显的影响。作用1周后，均显示对外源性（ca）14的突变有明显的抑制效应。但不能诱导hmlh1和hmsh2表达。结论 全反式维甲酸和茶多酚能抑制rer^+细胞中外源性（ca）14重复序列突变，提示两者对人癌细胞ms遗传不稳定有保护作用。其作用机理可能不是通过影响hmlh1和hmsh2的表达而起作用。完成机构：[1]南京医科大学应用毒理研究所210029 [2]第一附属医院